期刊简介
中华医学会主办。本刊主要刊载神经医学的新理论、新进展、新技术、新业务等，内容涵盖神经外科、神经内科以及神经生物等基础神经科学领域。本刊设置的主要栏目有基础研究、临床研究、专家论坛、国际动态、短篇论著、经验交流、病例报告、综述等，目前已成为展示和共享我国神经科学领域学术成就和科研成果的重要载体和平台。杂志迄今已被美国《化学文摘（CA）》、俄罗斯《文摘杂志（AJ）》、《中文核心期刊要目总览》、《中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）》、《中国科学引文数据库》等国内外数据库和检索机构收录。
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首页>中华神经医学杂志
- 杂志名称：中华神经医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1671-8925
- 国内刊号：11-5354/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
绿色荧光蛋白基因腺病毒载体转染人骨髓间充质干细胞的实验研究
许刚；徐如祥；姜晓丹；周德祥；姚鹏飞；秦昆；蔡颖谦；邹雨汐；秦玲莎
关键词：骨髓间充质干细胞, 绿色荧光蛋白, 腺病毒载体, 细胞分化
摘要：目的 研究绿色荧光蛋白基因(Ad-GFP)腺病毒载体在人骨髓间充质干细胞(BMSCs)转染和表达的量效关系及对细胞生物学特性的影响,探讨用该载体构建基因修饰BMSCs的可行性.方法 在体外分离培养人BMSCs,流式细胞仪检测细胞免疫表型,293细胞包装制备病毒,以不同滴度的Ad-GFP(1×103～1×1010PFU/mL)转染BMSCs,细胞计数法分析转染率,倒置显微镜观察细胞形态学改变,CCK8法检测细胞增殖活性,用血清撤离加入β-巯基乙醇诱导转染Ad-GFP的BMSCs向神经元样细胞定向分化. 结果 3～6代BMSCs表面标志CD34、CD45呈阴性而CD29、CD44呈阳性;当病毒滴度为1×107PFU/mL时转染率为55%,1×109及1×1010PFU/mL滴度时转染率均为85%,但1×1010PFU/mL滴度时出现细胞病理现象;7d荧光表达强,28 d仍可见荧光表达.荧光显微镜下可见表达Ad-GFP的BMSCs有三种亚群结构;滴度≥1×106PFU/mL时,BMSCs增殖在早期受到抑制,且呈剂量依赖;转染Ad-GFP的BMSCs经β-巯基乙醇诱导可分化为神经元样细胞,神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性.结论 合适滴度的Ad-GFP可以高效转染BMSCs,对细胞的生物学特性影响较小,不影响诱导分化功能,BMSCs可以作为用Ad-GFP载体系统进行基因治疗研究的种子细胞.
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