期刊简介
中华医学会主办。本刊主要刊载神经医学的新理论、新进展、新技术、新业务等,内容涵盖神经外科、神经内科以及神经生物等基础神经科学领域。本刊设置的主要栏目有基础研究、临床研究、专家论坛、国际动态、短篇论著、经验交流、病例报告、综述等,目前已成为展示和共享我国神经科学领域学术成就和科研成果的重要载体和平台。杂志迄今已被美国《化学文摘(CA)》、俄罗斯《文摘杂志(AJ)》、《中文核心期刊要目总览》、《中国科技论文统计源期刊(中国科技核心期刊)》、《中国科学引文数据库》等国内外数据库和检索机构收录。
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首页>中华神经医学杂志

- 杂志名称:中华神经医学杂志
- 主管单位:中国科学技术协会
- 主办单位:中华医学会
- 国际刊号:1671-8925
- 国内刊号:11-5354/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
MEK2基因siRNA的构建和筛选及其在人胶质瘤细胞中的表达
贺华;陶帮宝;胡国汉;骆纯;李兵;王君玉;卢亦成
关键词:RNA, 小分子干扰, 神经胶质瘤, MEK2, 真核表达载体
摘要:目的 构建MEK2-siRNA表达质粒,转染胶质瘤U87细胞并研究其对内源性MEK2表达的敲减效果.方法 化学合成4条60个碱基并能转录siRNA发卡结构的DNA寡核苷酸,退火形成2条双链DNA,以T4连接酶接入BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPER.basic载体中.EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定出阳性重组克隆,抽提质粒并转染胶质瘤U87细胞,Western blotting检测MEK2蛋白的表达水平.结果 酶切鉴定和测序结果表明MEK2-siRNA质粒构建成功,Western blotting结果筛选出较好的MEK2-siRNA质粒.未转染阴性对照质粒MEK2表达水平为0.105±0.023,转染筛选质粒后表达水平为0.030±0.006.结论 成功构建了MEK2-siRNA真核表达载体,并证明其能下调胶质瘤U87细胞中MEK2蛋白的表达水平,为RNA干扰技术应用于胶质瘤的基因治疗提供了一定的实验依据.
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