期刊简介
中华医学会主办。本刊主要刊载神经医学的新理论、新进展、新技术、新业务等，内容涵盖神经外科、神经内科以及神经生物等基础神经科学领域。本刊设置的主要栏目有基础研究、临床研究、专家论坛、国际动态、短篇论著、经验交流、病例报告、综述等，目前已成为展示和共享我国神经科学领域学术成就和科研成果的重要载体和平台。杂志迄今已被美国《化学文摘（CA）》、俄罗斯《文摘杂志（AJ）》、《中文核心期刊要目总览》、《中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）》、《中国科学引文数据库》等国内外数据库和检索机构收录。
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首页>中华神经医学杂志
- 杂志名称：中华神经医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1671-8925
- 国内刊号：11-5354/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
慢病毒介导磷酸二酯酶5基因修饰对大鼠脂肪干细胞效能的影响
黄昭；陈裕胜；吴晓琴；刘继云
关键词：脂肪干细胞, 磷酸二酯酶5, 缺血-复氧损伤, 细胞增殖, 细胞凋亡
摘要：目的 探讨慢病毒介导的磷酸二酯酶5(PDE5)基因抑制对大鼠脂肪干细胞(ADSCs)增殖、凋亡及分泌功能的影响及其可能机制. 方法 (1)分离纯化大鼠ADSCs,传代培养及鉴定.构建沉默PDE5基因不同位点的3组PDE5慢病毒表达载体(PDE5 shRNA1、PDE5 shRNA2、PDE5 shRNA3)并设置阴性对照(NC shRNA),采用慢病毒包装系统稳定转染ADSCs,应用RT-PCR检测ADSCs PDE5 mRNA表达,应用Western blotting检测ADSCs PDE5蛋白表达,以筛选出高效的转染细胞株.(2)实验分为4组:正常细胞组、缺血-复氧(I/R)损伤细胞组(正常细胞+I/R损伤)、阴性对照组(NC shRNA-ADSCs+I/R损伤)、PDE5 shRNA-ADSCs+I/R损伤组(PDE5 sh I/R组).采用CCK-8法及Edu法检测各组细胞24 h、48 h增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用ELISA法检测上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(FGF)及细胞内环磷鸟苷(cGMP)水平.结果 成功构建了PDE5慢病毒表达载体,筛选并成功建立了稳定低表达PDE5基因的ADSCs细胞株PDE5 shRNA-ADSCs.与正常细胞组相比,I/R损伤细胞组ADSCs增殖率明显降低,早期、晚期及总凋亡率均明显增加,上清液中VEGF、FGF水平及细胞内cGMP水平明显增高,差异均有统计学意义(P＜0.05);阴性对照组与I/R损伤细胞组比较差异均无统计学意义(P＞0.05);而与阴性对照组相比,PDE5 sh I/R组ADSCs增殖显著增加,凋亡率明显下降,且上清液中VEGF、FGF水平及细胞内cGMP水平进一步升高,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 PDE5基因表达被抑制后可能通过上调cGMP水平,有效改善ADSCs在I/R状态下的增殖、凋亡及分泌功能,优化其效能.
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