期刊简介
中华医学会主办。本刊主要刊载神经医学的新理论、新进展、新技术、新业务等，内容涵盖神经外科、神经内科以及神经生物等基础神经科学领域。本刊设置的主要栏目有基础研究、临床研究、专家论坛、国际动态、短篇论著、经验交流、病例报告、综述等，目前已成为展示和共享我国神经科学领域学术成就和科研成果的重要载体和平台。杂志迄今已被美国《化学文摘（CA）》、俄罗斯《文摘杂志（AJ）》、《中文核心期刊要目总览》、《中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）》、《中国科学引文数据库》等国内外数据库和检索机构收录。
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首页>中华神经医学杂志
- 杂志名称：中华神经医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1671-8925
- 国内刊号：11-5354/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
腺病毒载体介导shRNAs共调控胶质母细胞瘤细胞中miR-221/222的表达及功能的体外研究
王轩；韩磊；张安玲；王广秀；浦佩玉；于春江；申长虹；佟小光；康春生
关键词：胶质母细胞瘤, 小分子RNA, RNA干扰, 腺病毒载体, 基因治疗
摘要：目的 构建能够对胶质母细胞瘤小分子RNA(miR)-221和miR-222达到多层次、半定量、共调控效果的腺病毒载体系统. 方法 应用载体融合和短发夹RNA(shRNA)引导链3'端突变的策略构建出突变型(mut)-shmiR-221/222和经典型(class)-shmiR-221/222 2种共表达腺病毒载体并转导入LN229和U251细胞中,分别为class-shmiR-221/222转导组、mut-shmiR-221/222转导组,同时设空白对照组,采用实时荧光定量PCR检测3组细胞miR-221/222的表达,Western blotting检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(1Bp27kipl)蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期G1期阻滞情况,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,Caspase-3/7萤光素酶法检测细胞凋亡,编写基于核苷酸循环基序(NCM)的软件,推断shRNA和靶miR的准确三维结构并计算相应的自由能状态. 结果 空白对照组、mut-shmiR-221/222转导组、class-shmiR-221/222转导组细胞miR-221/222的表达依次下调;p27kipl表达水平依次上调;G0/G1期比例依次上调,S期比例依次下调,G1期阻滞比例依次上调;细胞破坏和丧失原有形态的程度依次上调,细胞数量依次下调;细胞凋亡依次增加,差异均有统计学意义(P＜0.05);自由能计算结果显示,mut-shmiR-221/222转导组(-32.7、-32.7)的引导链与靶miR结合时发生作用的热力学稳定性较class-shmiR-221/222转导组(-42.1、-41.5)减低. 结论 成功构建shRNA共表达腺病毒载体,利用shRNA引导链3'端突变的策略影响热力学稳定性可以对胶质母细胞瘤细胞miR-221/222多层次、半定量调控.
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