期刊简介
中华医学会主办。本刊主要刊载神经医学的新理论、新进展、新技术、新业务等，内容涵盖神经外科、神经内科以及神经生物等基础神经科学领域。本刊设置的主要栏目有基础研究、临床研究、专家论坛、国际动态、短篇论著、经验交流、病例报告、综述等，目前已成为展示和共享我国神经科学领域学术成就和科研成果的重要载体和平台。杂志迄今已被美国《化学文摘（CA）》、俄罗斯《文摘杂志（AJ）》、《中文核心期刊要目总览》、《中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）》、《中国科学引文数据库》等国内外数据库和检索机构收录。
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首页>中华神经医学杂志
- 杂志名称：中华神经医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1671-8925
- 国内刊号：11-5354/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
胎鼠内侧神经节隆起区γ-氨基丁酸能前体细胞的培养及鉴定
李益飞；李镇宇；陈文锦；陈晨；刘宁；徐如祥
关键词：内侧神经节隆起区, 前体细胞, 抑制性中间神经元
摘要：目的 探讨胎鼠内侧神经节隆起区(MGE)γ-氨基丁酸(GABA)能前体细胞的分离、培养及鉴定方法. 方法 体式显微镜下解剖分离E14.5孕鼠的胎鼠MGE脑组织,以含有音猥因子(SHH)信号通路激活剂的无血清培养基培养细胞至第3代及以上.(1)采用细胞免疫荧光染色检测MGE前体细胞中神经干细胞标记巢蛋白、SOX2、MGE转录因子NK2同源框蛋白1(Nkx2.1)及抑制性中间神经元前体细胞标记LIM同源框结合蛋白-6(LHX6)的表达以观察干细胞特性保持能力;(2)采用MTT法及BrdU免疫荧光染色检测体外培养1d、3d的MGE前体细胞的增殖能力;(3)采用细胞免疫荧光染色检测GABA能诱导培养基诱导分化5d时的MGE前体细胞神经元标记神经核抗原(NeuN)及抑制性中间神经元标记GABA、谷氨酸脱羧酶-1(GAD67)、小清蛋白(PV)的表达以观察细胞分化能力;(4)采用冰冻切片免疫荧光染色检测移植到小鼠体内1月后的MGE前体细胞在体内分化成GABA、GAD67、PV阳性细胞的情况. 结果 成功的从胎鼠MGE分离培养出具有自我更新、增殖能力的神经球.细胞免疫荧光染色检测显示MGE前体细胞中巢蛋白、SOX2及LHX6、Nkx2.1阳性表达.MTT法检测发现MGE前体细胞体外培养1d时吸光度值显著低于3d时(0.392±0.032 vs 0.811±0.017),差异有统计学意义(P＜0.05).BrdU免疫荧光染色显示MGE前体细胞体外培养1d时BrdU阳性细胞比例显著低于培养3d时(45.086±7.122 vs 61.786±10.540),差异有统计学意义(P＜0.05).细胞免疫荧光染色检测显示MGE前体细胞诱导分化培养5d时及移植到小鼠体内1月后分化为NeuN、GABA、GAD67、PV阳性的抑制性中间神经元. 结论 体外培养的MGE前体细胞仍具有前体细胞的干细胞特性及保持分化成抑制性中间神经元的能力.
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