期刊简介
中华医学会主办。本刊主要刊载神经医学的新理论、新进展、新技术、新业务等，内容涵盖神经外科、神经内科以及神经生物等基础神经科学领域。本刊设置的主要栏目有基础研究、临床研究、专家论坛、国际动态、短篇论著、经验交流、病例报告、综述等，目前已成为展示和共享我国神经科学领域学术成就和科研成果的重要载体和平台。杂志迄今已被美国《化学文摘（CA）》、俄罗斯《文摘杂志（AJ）》、《中文核心期刊要目总览》、《中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）》、《中国科学引文数据库》等国内外数据库和检索机构收录。
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首页>中华神经医学杂志
- 杂志名称：中华神经医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1671-8925
- 国内刊号：11-5354/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
β-淀粉样蛋白1-42寡聚体的制备、鉴定及其对星形胶质细胞的作用
黄小玉；杨灿洪；黄晓敏；麦汉滔；吕田明
关键词：阿尔茨海默病, β-淀粉样蛋白, 星形胶质细胞, 水通道蛋白-4
摘要：目的 探讨β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)寡聚体的制备和鉴定方法,并探讨其对体外培养的小鼠星形胶质细胞的作用. 方法 (1)溶解Aβ1-42多肽后取100 μmol/L Aβ1-42多肽母液,分别经4℃孵育24 h、4℃孵育72 h、37℃孵育24 h、37℃孵育72 h处理,应用电子显微镜观察和Western blotting对不同孵育条件制备的Aβ1-42进行鉴定.(2)将不同浓度的Aβ1-42寡聚体(由Aβ1-42多肽母液经4℃孵育24 h制备)加入到体外培养的星形胶质细胞中,采用CCK-8法检测不同浓度Aβ1-42寡聚体(0、0.1、0.5、1、5、10、50、100 μmol/L)处理后星形胶质细胞存活率的变化,采用免疫荧光染色检测不同浓度Aβ1-42寡聚体(0、1、10、50 μmol/L)处理后星形胶质细胞的形态变化,采用Western blotting检测不同浓度Aβ1-42寡聚体(0、1、10、50 μmol/L)处理后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及水通道蛋白-4(AQP4)表达的改变. 结果 (1)Aβ1-42多肽经不同孵育条件处理后,在电子显微镜观察和Western blotting检测中分别表现出不同形态和聚合度,其中经4℃孵育24 h制备的Aβ1-42寡聚体主要呈10nm颗粒状和短丝状物质的混合体;相对分子质量10 000左右的蛋白表达量减少,相对分子质量15 000～25 000的蛋白表达量增多.(2)不同浓度Aβ1-42寡聚体刺激星形胶质细胞24 h后,CCK-8法检测结果显示,细胞存活率随着浓度增加逐渐升高,其中与0μmol/L组比较,10、50及100μmol/L Aβ1-42寡聚体组细胞存活率显著增加,差异均有统计学意义(P＜0.05);免疫荧光染色观察发现,与0 μmol/L组比较,1、10及50μmol/L Aβ142寡聚体组星形胶质细胞呈活化状态,表现为胞体增大,细胞突起增多、伸长,呈放射状,GFAP荧光强度增强;Western blotting检测结果显示,随着Aβ1-42寡聚体浓度的增加,GFAP及AQP4蛋白表达均有升高趋势,其中与0μmol/L组比较,10及50 μmol/L Aβ142寡聚体组GFAP蛋白表达均明显增多,差异均有统计学意义(P＜0.05);与0μmol/L组比较,1、10及50 μmol/L Aβ1-42寡聚体组AQP4蛋白表达均明显增多,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 100 μmol/L Aβ1-42多肽经4℃孵育24 h能够制备Aβ1-42寡聚体.Aβ1-42寡聚体能激活星形胶质细胞并上调AQP4的表达,这可能是机体的一种自我保护机制.
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