期刊简介
中华医学会主办。本刊主要刊载神经医学的新理论、新进展、新技术、新业务等，内容涵盖神经外科、神经内科以及神经生物等基础神经科学领域。本刊设置的主要栏目有基础研究、临床研究、专家论坛、国际动态、短篇论著、经验交流、病例报告、综述等，目前已成为展示和共享我国神经科学领域学术成就和科研成果的重要载体和平台。杂志迄今已被美国《化学文摘（CA）》、俄罗斯《文摘杂志（AJ）》、《中文核心期刊要目总览》、《中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）》、《中国科学引文数据库》等国内外数据库和检索机构收录。
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首页>中华神经医学杂志
- 杂志名称：中华神经医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1671-8925
- 国内刊号：11-5354/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
RIP1/RIP3通路介导谷氨酸诱导的HT-22海马神经细胞损伤的体外研究
苏兴奋；王汉东；康德智；林元相；陈伏祥
关键词：谷氨酸, 程序性坏死, Nec-1, 受体相互作用蛋白激酶1/3, HT-22
摘要：目的 探讨受体相互作用蛋白激酶(RIP)1和RIP3通路是否介导谷氨酸诱导的HT-22海马神经细胞死亡. 方法 (1)体外培养小鼠海马神经细胞株HT-22,分为空白对照组、zVAD组、Nec-1组、谷氨酸组、谷氨酸+zVAD组、谷氨酸+zVAD+Nec-1组、谷氨酸+Nec-1组,zVAD、Nec-1、谷氨酸的终浓度分别为20 μmol/L、30 μmol/L、3 mmol/L,作用24 h后用Cell titer glo发光法细胞活力检测试剂盒(CTG)检测细胞存活率;碘化丙啶(PD及Hoechst细胞染色检测细胞的坏死;(2)将HT-22细胞分为空白对照组、谷氨酸组、谷氨酸+Nee-1组,浓度和作用时间同上,应用MitoSox red线粒体超氧化物指示剂检测细胞线粒体内活性氧自由基(ROS)水平;(3)将HT-22细胞分为空白对照组、谷氨酸组、谷氨酸+叔丁基茴香醚(BHA)组,BHA的终浓度为100 μmol/L,作用24 h后用PI及Hoechst细胞染色检测细胞的坏死;(4)将HT-22细胞分为RIP3 siRNA组、对照组,分别转染RIP3 siRNA、siRNA对照序列,72 h后Western blotting检测2组细胞RIP3蛋白的表达;(5)将HT-22细胞分为对照组、R1P3 siRNA组、谷氨酸组、RIP3 siRNA+谷氨酸组,分别各自转染siRNA对照序列、RIP3 siRNA,48 h后加入3 mmol/L谷氨酸,24 h后用PI及Hoechst细胞染色检测细胞的坏死,CTG检测细胞存活率. 结果 (1)与空白对照组比较,谷氨酸组、谷氨酸+zVAD组PI阳性细胞百分比升高,细胞存活率降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与谷氨酸组比较,谷氨酸+Nec-1组PI阳性细胞百分比明显减少,细胞存活率增加,差异有统计学意义(P＜0.05);(2)谷氨酸组HT-22细胞内的ROS水平明显高于空白对照组,谷氨酸+Nec-1组细胞内的ROS水平明显低于谷氨酸组,差异有统计学意义(P＜0.05);(3)谷氨酸组PI阳性细胞百分比高于空白对照组,谷氨酸+BHA组PI阳性细胞百分比低于谷氨酸组,差异有统计学意义(P＜0.05);(4)与对照组比较,RIP3siRNA组细胞内RIP3蛋白水平明显下调;(5)与对照组比较,谷氨酸组PI阳性细胞百分比升高、细胞存活率降低,与谷氨酸组比较,RIP3 siRNA+谷氨酸组阳性细胞百分比降低、细胞存活率升高,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 RIP1、RIP3通路及ROS介导谷氨酸诱导的HT-22海马神经细胞死亡.
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